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紅色四氮唑鹽法如何測定種子生活力?

紅四氮唑法:又稱TTC法,是國際上比較好的測定種子生活力的方法。其原理是氧化的無色氯化三苯基四氮唑接受活種子呼吸過程中脫氫酶產生的氫氣,成為紅色的還原性物質。有活力的種子脫氫酶活性往往較高,四唑被氫離子還原為紅色,死亡組織不著色,因此可以根據染色位置和染色深度判斷種子的生活力。

紅色四唑為白色或微黃色有毒粉末,應低溫避光保存。用蒸餾水配制0.1% ~ 1%溶液,用稀堿調pH至中性(如用pH7.5的0.05 ~ 0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液調pH至6.8 ~ 7.2更好)。把棕色的瓶子放在冰箱裏備用。

將供試種子浸泡16 ~ 24小時,然後小心地將種子沿種脊切成兩片,放入燒杯或培養皿中,切面朝下,將四氮唑溶液滴入型材中,放入25 ~ 30℃培養箱中8 ~ 24小時,然後取出洗凈,觀察染色反應。溫度越高,染色越快。如果放在室溫下,需要避光,因為四唑溶液對光敏感。有活力的種子胚被染成紅色,而無活力的種子不被染色或僅有淺紅色斑點。