紅色四唑為白色或微黃色有毒粉末,應低溫避光保存。用蒸餾水配制0.1% ~ 1%溶液,用稀堿調pH至中性(如用pH7.5的0.05 ~ 0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液調pH至6.8 ~ 7.2更好)。把棕色的瓶子放在冰箱裏備用。
將供試種子浸泡16 ~ 24小時,然後小心地將種子沿種脊切成兩片,放入燒杯或培養皿中,切面朝下,將四氮唑溶液滴入型材中,放入25 ~ 30℃培養箱中8 ~ 24小時,然後取出洗凈,觀察染色反應。溫度越高,染色越快。如果放在室溫下,需要避光,因為四唑溶液對光敏感。有活力的種子胚被染成紅色,而無活力的種子不被染色或僅有淺紅色斑點。